Mary Elizabeth Mastrantonio wuchs in einer italo-amerikanischen Familie in Lombard, Illinois, auf und studierte am University of Illinois. Auf frühen regionalen Bühnen wurde sie für Musicals entdeckt, was schließlich ihren Broadway-Durchbruch mit der Neuauflage von West Side Story 1980 brachte.
Kurz darauf folgte 1983 ihr Debüt auf der Leinwand in Brian De Palmas Scarface, in dem sie Al Pacinos Schwester spielte – ein prägender Part, der ihr den Weg zu einem begehrten Hollywood-Talent ebnete. Es folgten zentrale Rollen in The Color of Money (1986), The Abyss (1989), Robin Hood: Prince of Thieves (1991) und The Perfect Storm (2000), die ihre Vielseitigkeit zwischen Drama, Action und Science-Fiction unterstrichen.
Parallel zu ihren Filmrollen blieb Mastrantonio dem Theater treu und trat weiter auf Broadway und im West End auf – etwa in Man of La Mancha, wofür sie 2003 als beste Hauptdarstellerin nominiert wurde. Ihre beeindruckende Fernsehkarriere umfasst wiederkehrende Rollen in populären Serien von Law & Order: Criminal Intent bis Grimm und The Punisher – ein Beweis ihrer Fähigkeit, sowohl auf Bühne als auch auf dem Bildschirm dauerhafte Präsenz zu zeigen.
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