Der ehemalige Sozialarbeiter mit den markanten Gesichtszügen gehört zu den auffälligsten Nebendarstellern Hollywoods und war in mittlerweile mehr als zwei Dutzend Filmen zu sehen. Guzman wurde in Puerto Rico geboren und wuchs in Manhattan auf. Er graduierte vom City College und arbeitete später als Jugendberater im Henry Street Settlement House. Gleichzeitig sammelte er Erfahrungen beim Straßentheater und in Independentproduktionen. Aufmerksamkeit als Darsteller erregte er erstmals an der Seite von Don Johnson in der erfolgreichen Krimiserie "Miami Vice" (1985). Im Fernsehen trat Guzman zudem in den Serien "Law & Order" (1991), "New York Cops - NYPD Blue" (1993), "Walker, Texas Ranger" (1993), "New York Undercover" (1996) und "Oz" (1998) auf. Sein Kinodebüt gab Luis Guzman bereits 1977 in Robert M. Youngs gelungenen Drama "Im Netz der Gewalt", etwas mehr als zehn Jahre später sah man ihn in John Cornells Paul Hogan-Vehikel "Crocodile Dundee II" (1988), und mit James Woods spielte er in Joseph Rubens Kriminalfilm "Das dreckige Spiel" (1988).
Luis Guzmans Rollen wurden nun immer größer, so spielte er etwa in drei Filmen von Sidney Lumet: in der Krimikomödie "Family Business" (1988), dem Polizeifilm "Tödliche Fragen" (1990) sowie in dem Gerichtsthriller "Jenseits der Unschuld" (1993) mit Rebecca De Mornay. Prägnante Auftritt hatte Luis Guzman auch in Ridley Scotts harten Actionfilm "Black Rain" (1989), in John Badhams Actionthriller "Auf die harte Tour" (1991) mit Michael J. Fox, und in Sheldon Larrys Katastrophenfilm "Schwarzer Tod" (1992).
Ebenfalls 1992 besetzte John Landis Guzman in dem Horrorfilm "Bloody Marie - Eine Frau mit Biss" und Alan Metzger verpflichete ihn für den Thriller "Im Schatten eines Mörders". Sehenswert waren Guzmans Rollen als Ronald Sharkey in Jan Eglesons Thriller "Mörderische Affäre" und als Verräter an Al Pacino in Brian De Palmas Gangsterfilm "Carlito's Way" (1993), während er in Anthony Minghellas "Mr. Wonderful" ins Komödienfach wechselte. Eine Komödie war auch Gregg Champions "Sexy Cowboys schießen schärfer" (1994), doch mit "[mo.1994_handgun_hetzjagd_durch_new_york:Handgun - Hetzjagd durch New York]" kehrte Guzman noch im gleichen Jahr zum Genre des actiongeladenen Gangsterfilms zurück. Dagegen war "Stonewall" eine sehenswerte Milieustudie von Nigel Finch.
Nach Rollen in Robert Mandels Thriller "Mörderischer Tausch" (1996) und John Runbinos Drama "Lotto Land" (1996) wirkte Luis Guzman 1997 in Johnny Depps Regiedebüt "The Brave" (1997) mit und mimte in Paul Thomas Andersons vielgelobter Tragikomödie "Boogie Nights" das Mitglied einer Filmcrew, die sich auf Pornos spezialisiert hat. 1998 schließlich verkörperte Luis Guzman in Steven Soderberghs "Out of Sight" einen Ausbrecher, der nach kurzer Zeit von Jennifer Lopez dingfest gemacht wird, und in dem Thriller "Spiel auf Zeit" (1998, wieder unter der Regie von Brian De Palma) war Guzman an der Seite von Nicolas Cage und Gary Sinise auf der Leinwand zu sehen. Ebenfalls 1998 entstand der Thriller "One Tough Cop".
1999 standen für Luis Guzman gleich vier Produktionen auf dem Programm: Für seine überzeugende schauspielerische Leistung als Ed in Steven Soderberghs Thriller "The Limey" wurde er für einen Independent Spirit Award als bester Nebendarsteller nominiert, in Kinka Ushers Actionfilm "Mystery Men" hatte er einen ungenannten Auftritt als mexikanischer Restaurantbesitzer, Phillip Noyce verpflichtete ihn für seinen Thriller "Der Knochenjäger" und Paul Thomas Anderson für sein Drama "Magnolia".
Ein Höhepunkt seiner bisherigen Karriere ist sicher Guzmans Rolle als Bulle in Steven Soderberghs mit vier Oscars gekrönten Meisterwerk "Traffic - Macht des Kartells" (2000). Im gleichen Jahr gehörte er auch zum Cast des Dramas "Luckytown". 2001 folgte mit "Montecristo" eine weitere Variante des oft verfilmten Dumas-Stoffes, 2002 die Gaunerkomödie "Safecrackers oder Diebe haben's schwer".
Weitere Filme mit Luis Guzman: "Confidence", "Punch-Drunk Love", "The Salton Sea" (alle 2002), "Die Wutprobe","Das Urteil - Jeder ist käuflich" (beide 2003), "Harold & Kumar", "Lemony Snicket - Rätselhafte Ereignisse" (beide 2004), "Dreamer - Ein Traum wird wahr" (2005), "Fast Food Nation", "Der Date Profi - Was du brauchst, ist die richtige Masche!" (beide 2006), "Maldeamores", "War", "Cleaner - Sein Geschäft ist der Tod" (alle 2007), "Beverly Hills Chihuahua" (Sorecher(, "Nothing Like the Holidays", "Der Ja-Sager" (alle 2008), "Fighting", "Die Entführung der U-Bahn Pelham 123" (beide 2009), "Arthur" (2011), "Die Reise zur geheimnisvollen Insel" (2012).